Biotechnologia.pl
łączymy wszystkie strony biobiznesu
NOWY CEL MOLEKULARNY/ Heterogenność miejsc fosforylacji białka NS5A różnych genotypów wirusa HCV
21.01.2008
Spośród wielu białek wirusa zapalenia wątroby typu C, niestrukturalne białko 5A (a głównie NS5A) odgrywa kluczową rolę w cyklu życia tego wirusa.
Bierze ono udział w procesie replikacji wirusowego RNA. Ponadto, NS5A oraz jego skrócone formy modulują wiele procesów komórkowych. Wiele z funkcji tego białka zależy od jego ufosforylowania. Proces ten zachodzi przy udziale wielu kinaz komórkowych, m.in. kinazy kazeinowej typu 2 (CK2). Jak dotąd, niewiele wiadomo o CK2-fosforylacji białka NS5A pochodzącego z różnych genotypów HCV oraz izolatów klinicznych.

Autorzy przedstawiają analizę miejsc rozpoznawania CK2 w białku NS5A pochodzącego od pacjentów zainfekowanych różnymi genotypami HCV. Ponadto, przy użyciu syntetycznych peptydów oraz białek eksprymowanych w transferowanych komórkach, zbadano proces CK2-fosforylacji in vitro i in vivo.

Białko NS5A uzyskane od pacjentów zainfekowanych HCV-1a (24 przypadki), HCV-1b (9) lub HCV-3 (16) zanalizowano poprzez zsekwencjonowanie, a miejsca CK2-fosforylacji zdefiniowano przy użyciu dobrze zwalidowanej procedury jego przewidywania, opartej na poszukiwaniu odpowiedniego konsensusu. Fosforylację in vitro przeprowadzano przy użyciu rekombinowanej CK2 oraz peptydu syntetycznego lub badanego białka, natomiast fosforylację in vivo endogenną CK2 zbadano na podstawie białka eksprymowanego w komórkach raka wątroby.

Średnia liczba miejsc CK2-fosforylacji w pełnowymiarowym białku NS5A była znacząco wyższa w HCV-3, w porównaniu do HCV-1a (P <0.01) i HCV-1b (P <0.01). Ponadto, heterogenność miejsc rozpoznawania CK2 była zdecydowanie bardziej widoczna w HCV-1a i HCV-1b niż w HCV-3. Liczba przewidzianych miejsc CK2-fosforylacji korelowała z poziomem fosforylacji in vitro i in vivo białka NS5A przez CK2.

Przedstawiona praca wykazuje, że fosforylacja białka NS5A przez CK2 ma niejednorodny charakter w różnych genotypach HCV. Zjawisko to może mieć wpływ na biologię i patogenność tego niebezpiecznego wirusa
Źródło: F. Dal Pero et al., Heterogenity of CK2 phosphorylation sites in the NS5A protein of different hepatitis C virus genotypes; Journal of Hepatology, Dec. 2007, 47, 6, 768-776
KOMENTARZE
Newsletter