Jednak osiąganie wiarygodnych wyników podczas pipetowania zależy w dużej mierze od umiejętności użytkownika. Błędy wynikające ze złego operowania pipetą mogą wpływać istotnie na wyniki badań. Dlatego właściwa technika pipetowania odgrywa tak ważną rolę w uzyskiwaniu dokładnych i powtarzalnych pomiarów. Jak zatem poprawnie pipetować?

Poniżej 10 zasad prawidłowego pipetowania:

1. Zwracaj uwagę na warunki otoczenia..
Objętość cieczy odmierzana za pomocą pipety automatycznej zmienia się w zależności od temperatury. Dlatego podczas pipetowania temperatura pomieszczenia, pipety, cieczy i końcówki powinna być stała, w granicach 20-25 °C.

2. Przechowuj pipetę na statywie..
Ciepło dłoni ogrzewa pipetę podczas pipetowania zakłócając równowagę termiczną, w konsekwencji wpływa na objętość dozowanej próbki. Należy zatem unikać zbyt długiego przetrzymywania pipety w dłoni.


3. Używaj właściwej końcówki..
Końcówka powinna być elastyczna, cienkościenna i dobrze uszczelniać się na trzonie pipety. Jeśli używasz końcówek innych niż zalecane przez producenta pipety sprawdź kalibrację pipety. W przypadku, gdy błąd dokładności pipety przekracza dopuszczalne parametry pipetę należy zrekalibrować używając klucza kalibracyjnego.

4. Przepłucz końcówkę..
Przepłukiwanie polega na jedno- lub dwukrotnym pobraniu i wydaniu cieczy do tego samego naczynia. Przepłukiwanie końcówki jest szczególnie ważne, gdy pipetujemy ciecze lotne, gęste, lepkie lub o temperaturze innej niż temperatura otoczenia.


5. Trzymaj pipetę pionowo podczas pobierania cieczy..

6. Zanurz końcówkę na odpowiednią głębokość..
Głębokość zanurzenia końcówki w cieczy zależy od zakresu pojemności pipety:
Pojemność pipety (μl) Głębokość zanurzenia końcówki (mm)
2-20_____________________=< 1
20-100___________________2-3
200-1000_________________2-4
5000_____________________3-6
10000____________________5-7

7. Operuj przyciskiem pipetowania powoli i płynnie..
Zbyt gwałtowne pobieranie cieczy grozi zalaniem wnętrza trzonu pipety oraz powoduje pojawianie się pęcherzy powietrza w końcówce.


8. Po pobraniu próbki do końcówki odczekaj 1 sekundę zanim wyjmiesz końcówkę z cieczy..
W tym czasie następuje zatrzymanie pracy nurnika i ostateczne pobranie cieczy do końcówki. Następnie delikatnie wysuń końcówkę z cieczy, aby na jej zewnętrznej powierzchni nie zostały resztki cieczy.


9. Zmieniaj końcówkę..
Często zmieniaj końcówkę na nową, obowiązkowo, gdy zmieniasz dozowaną ciecz lub jeżeli na końcówce pozostały widoczne krople cieczy.

10. Regularnie czyść pipetę i sprawdzaj kalibrację.
W razie konieczności oddaj pipetę do serwisu.


Karolina Borowicz