Real Time PCR
Real-time PCR, czyli PCR w czasie rzeczywistym, zwany również ilościowym PCR (qPCR), stanowi modyfikację klasycznej reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Modyfikacja ta, przy zastosowaniu odpowiednich barwników i sond oraz odpowiedniej aparatury, umożliwia monitorowanie przyrostu produktu w każdym kolejnym cyklu trwania reakcji. Technika znalazła szerokie zastosowanie m.in. w diagnostyce medycznej, kryminalistyce, przemyśle spożywczym oraz w badaniach naukowych.
Nasz kurs obejmuje ilościowy PCR całościowo nie rozbijając go na poszczególne pojedyncze zagadnienia (np. analiza ekspresji, genotypowanie, HRM itd.). Uczestnicy rozpoczną od zapoznania się z programami do projektowania starterów i sond a następnie zapoznają się z przebiegiem reakcji ilościowego PCR, kluczowymi parametrami wpływającymi na wynik reakcji, sposobami optymalizacji reakcji oraz analizą wyników.
Zarówno podczas kursu jak również po kursie uczestnicy mogą konsultować z nimi swoje problemy z zakresu prowadzenia doświadczeń i analizy wyników qPCR.
Mamy nadzieję, że tegoroczny kurs będzie okazją do pogłębienia teoretycznej i praktycznej wiedzy z dziedziny qPCR oraz stworzy możliwość kontaktu osób z różnych środowisk naukowych.
PROGRAM KURSU
I dzień
09:00 – 09:15 Otwarcie kursu
09:15 – 10:15 Real Time PCR – wykład 1
10:15 – 10:45 Wydzielenie całkowitego RNA – ćw. I
10:45 – 11:15 Pomiar ilości i ocena jakości RNA – ćw. II
11:15 – 12:10 Synteza cDNA – ćw. III
12:10 – 13:10 Projektowanie starterów i sond do Real Time PCR – wykład 2
13:10 – 13:25 Przygotowanie wzorca – ćw. IV
Cz. 1. Nastawienie reakcji PCR
13:25 – 13:45 Przerwa
13:45 – 14:50 Real Time PCR – analiza wyników – wykład 3
14:50 – 15:20 Przygotowanie wzorca – ćw. IV
Cz. 2. Oczyszczenie produktów reakcji PCR
15:20 – 15:35 Przygotowanie wzorca – ćw. IV
Cz. 3. Pomiar ilości produktów reakcji PCR
15:35 – 16:00 Analiza ekspresji genów (metoda bezwzględna) – ćw. V
II dzień
09:00 – 09:15 Określenie względnego tempa ekspresji genów (metoda podwójnej delty, metoda Pfaffa) – ćw. VI
09:15 – 10:15 Optymalizacja reakcji Real Time PCR - wykład 4
10:15 – 11:15 Krzywe topnienia i High Resolution Melting PCR – wyk. 5
11:15 – 11:30 Genotypowanie metodą HRM-PCR – ćw. VII
11:30 – 11:45 Przerwa
11:45 – 12:00 Interpretacja wyników ćwiczeń V i VI
12:00 – 13:00 Aparatura i odczynniki do qPCR
13:00 – 13:15 Interpretacja wyników ćwiczeń VII
13:15 Zakończenie kursu
Prowadzący: Dr hab. Tadeusz Malewski
Termin: 28-29 sierpnia 2017
Miejsce: Muzeum i Instytut Zoologii, PAN, ul. Wilcza 64, Warszawa
Karty Zgłoszenia oraz opłaty należy przesyłać do dnia 24 sierpnia 2017
Ponieważ ilość miejsc jest ograniczona organizatorzy zastrzegają sobie prawo do wcześniejszego zamknięcia listy w przypadku wyczerpania wolnych miejsc.
Dodatkowych informacji udziela:
Dr Arleta Malewska: mbs@mbs.biz.pl, Tel (22) 668 24 83; 607 929 471
Opłata za udział w kursie wynosi 1300 zł netto + 23% VAT
Zamawiający zwolniony z podatku VAT proszony jest o dostarczenie drogą elektroniczną (e-mail: mbs@mbs.biz.pl) stosownego oświadczenia.
Opłata obejmuje:
Opłatę należy wpłacić na konto:
MBS Szkolenia, Konferencje, Usługi Sp. z o.o.
03-766 Warszawa, ul. Grajewska 6/8 m. 26
Bank Polska Kasa Opieki S.A. Oddział w Warszawie
80 1240 6074 1111 0010 4915 6042
NIP 113 286 12 19; REGON 146448470; KRS 0000444499
Przy wpłacie prosimy o podanie nazwiska osoby, której udział w kursie jest opłacany.
Uczestnicy otrzymają certyfikat ukończenia szkolenia