Biotechnologia.pl
łączymy wszystkie strony biobiznesu

Farmacja, Biotechnologia, Kosmetologia

Ilościowy PCR (qPCR)
Data rozpoczęcia:
2015-04-16
Data zakończenia:
2015-04-18
Miejsce
Warszawa

Real-time PCR, czyli PCR w czasie rzeczywistym, zwany również ilościowym PCR (qPCR), stanowi modyfikację klasycznej reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR). Modyfikacja ta, przy zastosowaniu odpowiednich barwników i sond oraz odpowiedniej aparatury, umożliwia monitorowanie przyrostu produktu w każdym kolejnym cyklu trwania reakcji. Technika znalazła szerokie zastosowanie m.in. w diagnostyce medycznej, kryminalistyce, przemyśle spożywczym oraz w badaniach naukowych.

Zajęcia podczas szkolenia  będą prowadzone na aparatach RotorGene 6000 Techne PrimeQ  i AppliedBiosystems 7500 oraz porównać ich możliwości. Część praktyczna kursu zaczyna się od syntezy cDNA i przygotowania wzorców. Nasz kurs obejmuje ilościowy PCR całościowo nie rozbijając go na poszczególne pojedyncze zagadnienia (np. analiza ekspresji, genotypowanie, HRM itd.). Uczestnicy zapoznają się z przebiegiem reakcji ilościowego PCR, kluczowymi parametrami wpływającymi na wynik reakcji, sposobami optymalizacji reakcji oraz analizą wyników. Wszystkie ćwiczenia uczestnicy wykonują w parach.

Zarówno podczas kursu jak również po kursie uczestnicy mogą konsultować swoje problemy z zakresu prowadzenia doświadczeń i analizy wyników qPCR. Mamy nadzieję, że tegoroczny kurs będzie okazją do pogłębienia teoretycznej i praktycznej wiedzy z dziedziny qPCR oraz stworzy możliwość kontaktu osób z różnych środowisk naukowych.

 

Program kursu:

 

I dzień

 

09:00 – 09:15

Otwarcie kursu

 

09:15 – 10:15

Ilościowy PCR (qPCR) – wykład 1

 

10:15 – 10:45

Pomiar ilości i ocena jakości RNA (nanodrop, elektroforeza) – ćw. I

 

10:45 – 11:00

Synteza cDNA – ćw. II

 

11:00 – 11:15

Przerwa

 

11:15 – 12:15

Krzywe topnienia i High Resolution Melting PCR – wykład 2

 

12:15 – 12:30

Przygotowanie wzorca – ćw. III

Cz. 1. Nastawienie reakcji PCR

 

12:30 – 13:30

qPCR – warunki reakcji i wzorce: optymalizacja – wykład 3

 

13:30 – 14:30

Aparatura i odczynniki do qPCR – wykład 4

 

14:30 – 15:00

Przerwa

 

15:00 – 15:30

Przygotowanie wzorca – ćw. III

Cz. 2. Oczyszczenie produktów reakcji PCR

 

15:30 – 15:45

Przygotowanie wzorca – ćw. III

Cz. 3. Pomiar ilości produktów reakcji PCR (nanodrop, Qubit)

 

15:45 – 16:00

Analiza ekspresji genów (metoda bezwzględna) – ćw. IV

 

II dzień

09:00 – 09:15

Określenie względnego tempa ekspresji genów (metoda podwójnej delty,

metoda Pfaffa) – ćw. V

09:15 – 10:15

Digital PCR – wykład 5

10:15 – 11:15

Zaawansowane systemy do wysokoprzepustowej analizy DNA – wykład 6

11:15 – 11:45

Interpretacja wyników ćwiczeń IV i V

11:45 – 12:00

Przerwa

12:00 – 12:15

Genotypowanie metodą HRM-PCR – ćw. VI

12:15 – 13:15

qPCR – analiza wyników - wykład 7

13:15 – 14:15

Praca z aparatem Rotorgene 6000 – demo

14:15 – 14:45

Przerwa

14:45 – 17:00

Zapoznanie się pracą i programowaniem Rotorgene 6000 w podgrupach

III dzień

09:00 – 09:15

Genotypowanie z zastosowaniem sond TaqMan – ćw. VII

09:15 – 10:15

Od planowania doświadczenia do publikacji (zgodnie z wymogami MIQE - Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiment) – wykład 8

10:15 – 11:15

Najczęstsze problemy w analizie metodą qPCR – wykład 9

11:15 – 11:30

Interpretacja wyników ćwiczeń VI i VII

11:30 – 11:45

Przerwa

11:45 – 14:00

Zapoznanie się pracą i programowaniem 7500 Real Time system oraz PrimeQ w podgrupach

14:00

Zakończenie kursu

14:00 – 16:00

Indywidualne konsultacje

       

 

Prowadzący: Dr hab. Tadeusz Malewski; mgr Katarzyna Kowalewska

 Termin: 16 – 18 kwietnia 2015 roku

 Miejsce: Muzeum i Instytut Zoologii PAN, ul. Wilcza 64 Warszawa

 

 Karty Zgłoszenia oraz opłaty należy przesyłać do dnia 14 kwietnia 2015 r.

 Ponieważ ilość miejsc jest ograniczona organizatorzy zastrzegają sobie prawo do wcześniejszego zamknięcia listy w przypadku wyczerpania wolnych miejsc.

 

 Dodatkowych informacji udziela:

Dr Arleta Malewska: mbs@mbs.biz.pl, Tel (22) 401 10 38;  607  929 471

 Opłata za udział w kursie wynosi 1730 zł brutto.

 Opłata obejmuje:

  • udział w szkoleniu
  • materiały szkoleniowe
  • przerwy kawowe
  • konsultacje z prowadzącymi

 Opłatę należy wpłacić na konto:

MBS Szkolenia, Konferencje, Usługi Sp. z o.o.

03-766 Warszawa, ul. Grajewska 6/8 m. 26

 

Bank Polska Kasa Opieki S.A. Oddział w Warszawie

80 1240 6074 1111 0010 4915 6042 

NIP 113 286 12 19;  REGON 146448470; KRS 0000444499

 

Przy wpłacie prosimy o podanie nazwiska osoby, której udział w kursie jest opłacany.

 Uczestnicy otrzymają certyfikat ukończenia szkolenia

Newsletter